千舍生物
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2020-315
樣品前處理：a)對于貼壁細胞：去除培養液，用PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下，使裂解液和細胞充分接觸。b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250ul裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。c)對于組織樣品：把組織剪切成細小的碎片。按照每20...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物提示細胞培養需注意哪些細節養細胞是一件戳心戳肺的事情，你要像照顧小孩一樣仔細對待，愛護她，呵護她。如果你照顧的時候能注意這些問題，會讓你的細胞養的更好。下面就將養細胞的注意事項跟大家交流一下。一、細胞培養前的準備在您帶上手套開始細胞培養之前,先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足,以免在開始實驗后再次出入操作臺，這樣可以降低細胞污染的風險。細胞培養基也應先預熱,選擇只預熱部分培養基而非整瓶加熱,不但可以節約實驗時間,而且可以避免因反復加熱培養基而造成的蛋白質降解。結...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何挽救細胞污染以自建細胞系(laryngealsquamouscarcinoma-1，LSC-1)第12代的某一被細菌污染的細胞株采取救治，比較效果并分析細胞生物學特性。一、實驗方法1、抗生素法：細菌培養：用無抗生素*培養液培養細胞3d，收集上清離心后將沉淀物接種于血瓊脂培養基，35e培養。所采用的抗生素包括臨床常用的15種抗生素，抗生素zui適抑菌濃度篩選:根據細菌藥敏實驗結果選出敏感抗生素，每種抗生素從zui低抑菌濃度MIC到zui高耐藥濃度分別配制6個...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何解決“細胞空泡化”“細胞空泡化”在細胞培養中也是一個常見問題，它的出現原因有多種，實驗人員碰到往往會很頭疼。在文章中小給列舉出了可能出現這種情況的原因，方便大家進行分析選擇解決的方法。一、可以引起細胞空泡化出現的原因有哪些？1.細胞老化原代細胞培養的過程中經常出現這樣的情況，是有些細胞處于終末分化狀態，不會再分裂，時間長了就會空泡化而死亡。傳代細胞出現這種狀況比較少見，出現的原因一般都是因為細胞傳代次數過多，老化嚴重。2.PH值培養液的PH值與細胞正常所需...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物教你如何選擇培養基和血清細胞培養是實驗室里常規和基礎的實驗了，但卻不是簡單的。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好，轉染、藥篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多，讓我們先從培養基和血清說起。經典的培養基有很多種，GIBCO、HyClone、Sigma等。其中DMEM、RPMI-1640、MEM、DMEM/F12都是應用zui廣泛的培養基。其他如M199、IMDM、L15培養基等也用于某些細胞的培養。◆MEM是由Eagle’s基礎培養基...
查看更多2020-313
蘇州千舍生物提示細胞培養需注意事項細胞培養在生命科研的地位舉足輕重。實驗君的很多成果可謂是成也細胞培養，敗也細胞培養。然而細胞虐我千百遍，我待細胞如初戀！科研人是不會這么被輕易打敗的。1.新買的細胞如何處理？細胞剛拿到手應趕緊做這幾件事：檢測瓶子是否破裂；培養基是否漏出，是否渾濁；是否有支原體污染；迅速擴增凍存。2.能否使用與原先培養條件不同的培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應的細胞培養基，若驟然使用和原先提供培養條件不同的培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無...
查看更多2020-312
蘇州千舍生物教你如何培養細胞之細胞消化細胞培養，尤其是細胞系的培養，就細胞消化而言，多做、善于總結，就可以把細胞養的越來越好。絕大部分細胞消化只要用胰酶潤洗一遍即可：吸去胰酶后，殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞（絕大部分1min不到）。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞，連續這樣傳代，對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去，胰酶潤洗吸去，然后37度消化。怎樣算是消化好了呢？不需要把細胞全部消化成間隔分布很離散的單個圓形...
查看更多2020-312
蘇州千舍生物教你如何更好的培養細胞在細胞培養過程中會出現這樣或那樣的問題，這些問題從細胞生長角度來說，針對細胞不貼壁、生長緩慢、生長不好，甚至死亡的原因，我們做以下分析并提出相對應的解決方法。一、培養細胞不貼壁可能原因：●胰蛋白酶消化過度；●支原體污染；●培養基pH值過堿（NaHCO3分解）；●細胞老化；●接種細胞起始濃度太低或太高。解決方法：●縮短胰蛋白酶消化時間或降低胰蛋白酶濃度；●分離培養物，檢測支原體。清潔支架或培養箱。如發現支原體污染，丟棄培養物；●使用無菌醋酸溶液...
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