產品名稱：通過STR鑒定U251 MG (KO)人星形膠質瘤細胞

貨號：QS-H191

細胞規(guī)格：1-3×10^6細胞量

庫存狀態(tài)：現(xiàn)貨

運輸方式：常溫順豐運輸和干冰順豐運輸

貨 期：復蘇細胞需要1-2周，凍存細胞的需要2-3天（特殊情況會有說明）

質 控：無支原體、無污染、符合標準

研究范圍：僅供科研使用

通過STR鑒定U251 MG (KO)人星形膠質瘤細胞   

我司主要經營產品是國內傳代細胞和細胞培養(yǎng)相關的生物試劑。GIBCO、HyClone、NTC、SIGMA、 BI 、GEMINI、PAN和SBI無外泌體血清等高品質血清。常規(guī)液體培養(yǎng)基、胰酶、雙抗、無血清凍存液、日本三菱產品、ELISA 試劑盒等產品。售后完善，我們以飽滿的熱情歡迎新老客戶選購！

我司以客戶為核心，以產品質量求生存，以售后服務求信譽。我們通過不斷改進來提高效率，絕不以犧牲品質作為代價。“誠信、創(chuàng)新、嚴謹、專業(yè)”愿以飽滿的熱情期待各界朋友攜手合作，共創(chuàng)輝煌！

一、客戶收到細胞后需注意事項：

1、收到細胞，請查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請盡快聯(lián)系。

2、收到細胞，如包裝完好，請在顯微鏡下觀察細胞。由于運輸途中的影響，細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時，請不要打開細胞培養(yǎng)瓶，應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右，讓細胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁，請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力，如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理。

3、收到細胞后，請顯微鏡下觀察細胞，用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多，請離心收集細胞，接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的*培養(yǎng)液，使用進口胎牛血清。剛接到細胞，若細胞不多時血清濃度可以提高5％去培養(yǎng)。若細胞達到80%左右，血清濃度按照說明書要求進行調配。

4、收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)；超過80%匯合度時，請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)，懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。

5、將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時之需。

6、24小時后，細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細胞生長面為準）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時間以具體細胞為準，一般1-3分鐘，不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁，見細胞脫落下來，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內離心，1000rpm/5min。棄上清，視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細胞量多可一傳三，有些細胞不易傳得過稀，有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶，以具體細胞和經驗為準。（懸浮細胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。

7、貼壁細胞，懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時，換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。    

    血清是一種*培養(yǎng)基，含有細胞生長繁殖所需的多種營養(yǎng)成分，如蛋白質、多肽等，多用于細胞培養(yǎng)、生物制品及診斷試劑的生產。

血清的主要成分是蛋白質，血清的組成成分與含量常常與供血動物性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件有關。

那么如何挑選合適的血清？使用血清時，需要注意哪些問題？現(xiàn)在我們一起來看看。

二、胎牛血清和新生牛血清

1.取血年齡不同：牛血清按照牛取血時間或牛齡可進行區(qū)分。胎牛血清（Foetal Bovine Serum，簡稱FBS）指的是取自未出生，母牛剖腹得來的胎牛。

國產胎牛血清（并無明確定義，但通常以此稱）的指的是出生4-6小時，且未進行哺乳進食的牛，有時還稱作國產新生牛。 

新生牛血清指的是出生14天-3個月進行取血的牛，成年牛血清指的是取血時牛齡通常超過12個月的牛。

以上取血牛齡的差異主要是受當?shù)貒倚竽翗I(yè)的發(fā)展及法規(guī)限制影響，因為牛血多為畜牧業(yè)副產業(yè)，并未有專門為取血而養(yǎng)的牛。

組分與比例不同：這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規(guī)來說，年齡越小的牛血清，細胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛，且因為胎牛未進食過母乳，所以IgG含量低。

用途與用法不同：根據細胞所需生長條件可確定。

2.如何挑選適合細胞生長的血清？

原代或是正常細胞株建議使用優(yōu)等或特級胎牛血清，對生長條件要求高的細胞和干細胞可選用特級胎牛血清，或胚胎干細胞胎牛血清。

由于血清有批間差異，細胞種類不同，我們建議客戶購買前可先申請試用樣品，通過篩選得到滿意的血清批號，之后根據項目需求可進行批量囤貨，以保證該項目所需血清質量的一致性，可排除不同批號血清對于實驗帶來的影響。

3.如何正確保存血清？

需要長期保存的血清必須儲存于-20℃冰箱（未開封血清有效期為5年）。若存放于4℃，請勿超過1個月，若一次無法用完一瓶，建議將血清無菌分裝并冷凍。

4.如何解凍血清？

血清解凍需采用逐步解凍法：將血清從-20℃冰箱放入4℃冰箱中溶解一天，然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻（小心勿造成氣泡），減少沉淀生成。切勿直接將血清從-20℃轉入37℃解凍，這樣因溫差較大易造成蛋白質凝結并出現(xiàn)沉淀。

5.需要對新買的血清進行過濾嗎？

血清在ISO13485認證的廠房中生產，經過3次0.1μm過濾，出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養(yǎng)測試及無菌檢測，污染幾率非常低。通常細胞污染有非常多的可能性，根據協(xié)助使用者進行分析檢測，結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。因此買來的血清不需要再次進行過濾。

6.除了對血清進行檢測，有何更直觀的方式分辨血清質量？

目測法，我們可根據血清的顏色，沉淀，澄清度等進行區(qū)分。

顏色：顏色根據血清蛋白含量的不同，可表現(xiàn)出黃色或者紅色。進口血清質量較好的呈現(xiàn)出淡黃、微紅色，較差質量呈現(xiàn)出橘紅色或鮮紅色。熱滅活血清或保存不當?shù)模捎谘t蛋白的破壞氧化，會呈現(xiàn)出暗紅色，甚至咖啡色。

沉淀：血清中的沉淀主要是有纖維蛋白的凝聚產生。沉淀產生的原因很多，使用時反復凍融會增加沉淀。進口血清過濾分裝前很少反復凍融，因此成品清澈。

澄清度：進口血清是由于蛋白和脂類等物質含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡。國產血清絕大多數(shù)為新生牛血清，相對而言更加粘稠，顏色略深。

7.為何血清會存在批間差？如何避免此影響？

因為血清來源于動物，其組成成分有1000種左右，每個批號的組分和組分含量都是不固定的，因此批間差異是可能存在的。

為了避免批間差異對細胞的影響，建議先進行批號測試，篩選合適的批號，備好庫存（血清未開封時，在-20℃下可保存5年）。如需更換血清批次或產地，建議先試用后再大量訂購。

8.血清中沉淀是什么成分？造成原因有哪些？如何預防和處理沉淀？

血清中沉淀主要有：纖維蛋白（絮狀沉淀），甲胎蛋白，脂蛋白，冷凝集素，玻粘連蛋白，磷酸鈣[1]（顯微鏡下小黑點沉淀），膽固醇等。

原因：造成沉淀的主要原因是溫度的改變。熱滅活，反復凍融，長期儲存于2-8℃或者室溫。

預防措施與建議：因此不立即使用的血清應保存在-20℃或以下。

9.血清為何要熱滅活，有必要對所有血清都滅活嗎？如何正確的進行滅活？

加熱可以滅活補體系統(tǒng)。啟動的補體系統(tǒng)參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，啟動淋巴細胞和巨噬細胞活化。在免疫學研究中，培養(yǎng)ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。

實驗顯示，熱滅活血清對大多數(shù)的細胞而言是不需要的，對于非必須的細胞來說血清滅活對于細胞生長只有微小甚至無任何作用，還可能造成生長速率降低，沉淀物還會顯著增多，不利于細胞觀察。因此，若非必須，不需要對血清進行滅活處理。

將需要進行處理的血清置于56℃水浴30min，建議加放空白對照（同體積水）使用溫度計測溫，以測得溫度為56℃時為計時起始點，加熱中可不時輕度旋轉混勻血清。

Hyclone胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML

Hyclone優(yōu)等胎牛血清FBS SH30406.05 New Zealand 500ML

Hyclone特級胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML

Hyclone特級胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML

Hyclone活性炭/葡聚糖處理 SH30068.03 USA 500ML

Hyclone馬血清      SH30074.03 USA 500ML

Hyclone烏拉圭胎牛血清 SV30087. 03 Uruguay 500ML

Hyclone標準胎牛血清  SH30071.03 USA 500ML

Hyclone優(yōu)等胎牛血清  SV30160.03 SOUTH AMERICA 500ML

Hyclone新生牛血清 SH30413.02 New Zealand 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-EU-015 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML

SERANA胎牛血清FBS S-FBS-AU-015 AUSTRALIA 500ML

SERANA超低IgG胎牛血清 S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML

SERANA透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML

SERANA活性炭/葡聚糖處理 S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS New Zealand 500ML

BOVOGEN胎牛血清FBS SFBS AUSTRALIA 500ML

BOVOGEN新生牛血清   New Zealand 500ML

PAA 普通胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML

PAA 優(yōu)等胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML

BI優(yōu)等胎牛血清 04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML

BI ES級別胎牛血清 04-002-1A SOUTH AMERICA 500ML

BI 間充質干細胞胎牛血清 04-400-1A SOUTH AMERICA 500ML

Corning康寧優(yōu)等胎牛血清 35-076-CV AUSTRALIA 500ML

PAN胎牛血清FBS P30-3302 SOUTH AMERICA 500ML

PAN胎牛血清FBS ST30-3302 SOUTH AMERICA 500ML

PAN ES級別胎牛血清 ST30-2602 SOUTH AMERICA 500ML

PAN胎牛血清FBS Plus ST30-3302P SOUTH AMERICA 500ML

NTC優(yōu)等胎牛血清 SFBE 阿根廷 500ML

Gemini優(yōu)等胎牛血清 900-108 SOUTH AMERICA 500ML

Gemini特級胎牛血清 100-500 USA 500ML

Gemini科研用人AB血清 100-512 USA 100ML

TCB胎牛血清 101ZC New Zealand 500ML

Sigma 特級胎牛血清 F2442 USA 500ML

Sigma正常人AB血清 H4522 USA 100ML

SBI 無外泌體血清 EXO-FBS-50A-1 USA 50ML

GIBCO 雙抗 15140-122 100ml

GIBCO 胰酶 25200-056 100ml

GIBCO 胰酶 25200-072 500ml

DMEM高糖培養(yǎng)基 C11995500BT 500ml

DMEM低糖培養(yǎng)基 C11885500BT 500ml

PBS C10010500BT 500ml

1640培養(yǎng)基 C11875500BT 500ml

DMEM/F12 C11330500BT 500ml

MEM C11095500BT 500ml

α-MEM C12571500BT 500ml

HyClone 雙抗 SV30010 100ml

HyClone 胰酶 SH30042.01 100ml

DMEM低糖 SH30021.01 500ml

DMEM高糖（不含丙酮酸鈉） SH30022.01 500ml

DMEM/F-12 1:1 SH30023.01 500ml

MEM/EBSS SH30024.01 500ml

IMDM SH30228.01 500ml

DMEM高糖（含丙酮酸鈉） SH30243.01 500ml

M199/EBSS SH30253.01 500ml

PBS緩沖液 SH30256.01 500ml

α-MEM SH30265.01 500ml

改良型RPMI-1640 SH30809.01 500ml

DPBS SH30028.02 500ml