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iPS細胞培養基的使用說明

更新時間:2023-03-28點擊次數:1293

iPS細胞培養基

貨號:WS-IPS-100

規格:500mL

儲存條件:基礎培養基2 ~ 8℃,添加劑-80 ~ -20℃;混勻后2 ~ 8℃,2周內使用完畢。

產品簡介:

iPS細胞培養基是一種適用于無飼養層培養、化學成分明確、并且不含動物源蛋白的人多潛能干細胞(hESC/hiPSC)wan全培養基。iPS細胞培養基是在James Thomson實驗室開發的Essential 8培養基的基礎上,由公司改良研發出的最新型多潛能干細胞wan全培養基。hESC/hiPSC在iPS細胞培養基中可以快速增殖,而分化的細胞則無法在該培養基中生長,從而選擇性擴增并獲得高純度多潛能干細胞。

產品內容:

名稱

規格

數量

iPS細胞基礎培養基

500mL

1瓶

iPS細胞添加劑

20mL

1支

試劑準備:

iPS細胞wan全培養基:將iPS細胞添加劑加入iPS細胞基礎培養基中形成iPS細胞wan全培養基(推薦每2mL添加劑與50mL基礎培養基混合)。

iPS細胞wan全培養基可在2-8℃穩定儲存2-3周。

疑難解答:

•是否還需要往iPS細胞wan全培養基中補充或添加成分?

不需要。iPS細胞培養基中各個成分的質量和濃度都經過了優化實驗,wan全支持人ESC/iPSC的長期培養,您無需再自行添加。

•培養基中有沉淀狀物質是否是質量問題?

添加劑在解凍過程中,若有少量沉淀析出,屬于正常現象,不影響使用,請充分混勻后與基礎培養基混合。但添加劑不能在37℃解凍,否則會析出大量沉淀,影響培養基的效價。如果培養基中出現大量沉淀,請不要使用。

•是否能在37 ℃反復水浴iPS細胞wan全培養基?

不能。頻繁地在4℃和37℃之間轉換會導致iPS細胞wan全培養基中含有的因子失活,iPS細胞wan全培養基在使用前平衡至室溫即可。

• iPS細胞在傳代后不貼壁怎么解決?

造成iPS傳代后不貼壁的最可能的原因:

① 細胞消化時間不合適;②消化后吹打次數不合適,使得完成傳代后細胞集落過大或過小。

• iPS分化怎么處理?

①細胞在剛復蘇或傳代時,小的細胞團不呈現標準的克隆形態,培養幾天或傳代后可恢復。②如果iPS分化的表現為干細胞克隆形態良好,克隆周邊出現散在的分化細胞,可通過高比例傳代(≥1:10),使得分化細胞的密度減少,低密度的分化細胞可被iPS培養體系篩選去除,如未wan全去除,可用細胞刮或巴斯德管刮除。

③如果iPS分化的表現為克隆內部松散,邊緣不平滑,在分化比例小或分化不嚴重的情況下,可通過連續傳代2 ~ 3次恢復,如果分化嚴重,建議棄除。

• 細胞復蘇率低是什么原因?

細胞復蘇需使用iPS細胞復蘇培養基,可大大提高細胞的復蘇效率。復蘇過程中,轉移細胞、吹打混勻和重懸細胞時,吹打力度要輕柔,并盡量減少吹打次數,細胞接種后,即刻在顯微鏡下觀察細胞團塊的大小,4 ~ 10個細胞的團塊為最佳。如果吹打力度過大或次數過多,

導致細胞分散成單細胞,細胞復蘇率將偏低。



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